分光光度法的使用使用始于牛頓，1665年牛頓做了一個(gè)試驗(yàn)：他讓太陽(yáng)光透過暗室窗上的小圓孔，在室內(nèi)形成很細(xì)的太陽(yáng)光束，該光束經(jīng)棱鏡色散后，在墻壁上呈現(xiàn)紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫的色帶。這色帶就稱為“光譜”。牛頓通過這個(gè)實(shí)驗(yàn)，揭示了太陽(yáng)光是復(fù)合光的事實(shí)。1815年夫瑯和費(fèi)仔細(xì)觀察了太陽(yáng)光譜，發(fā)現(xiàn)太陽(yáng)光譜中有600多條暗線，并且對(duì)主要的8條暗線標(biāo)以A、B、C、D、E、F、G、H符號(hào)。這是人們zui早知道的吸收光譜線，被稱為“夫瑯和費(fèi)線”，但當(dāng)時(shí)對(duì)這些線還不能做出正確的解釋。1859年本森和基爾霍夫發(fā)現(xiàn)由食鹽發(fā)出的黃色譜線的波長(zhǎng)和“夫瑯和費(fèi)線”中的D線波長(zhǎng)*一致，才知道一種物質(zhì)所發(fā)射的波長(zhǎng)（或頻率），與它所能吸收的波長(zhǎng)（或頻率）是一致的。1862年密勒應(yīng)用石英攝譜儀測(cè)定了100多種物質(zhì)的紫外吸收光譜。他把光譜圖表從可見區(qū)拓展到了紫外區(qū)，并指出吸收光譜不僅與組成物質(zhì)的基因有關(guān)，而且與分子和原子的性質(zhì)有關(guān)。此后，哈托萊和貝利等人又研究了各種溶液對(duì)不同波段的截止波長(zhǎng)。并發(fā)現(xiàn)與吸收光譜相似的有機(jī)物，它們的結(jié)構(gòu)也相似。并且可以解釋用化學(xué)方法所不能說(shuō)明的分子結(jié)構(gòu)問題，初步建立了分光光度法的理論基礎(chǔ)，以此推動(dòng)了分光光度計(jì)的發(fā)展。1918年美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局研制成了世界上*臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)，此后，分光光度計(jì)得到了發(fā)展，并且很快在各個(gè)領(lǐng)域的分析工作中得到了應(yīng)用。1760年瑯伯發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對(duì)光的吸收與物質(zhì)的厚度成正比，后被人們稱之為瑯伯定律；1852年比爾發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對(duì)光的吸收與物質(zhì)的濃度成正比，后被人們稱之為比爾定律。在應(yīng)用的過程中，人們把瑯伯定律和比爾定律結(jié)合起來(lái)，稱之為瑯伯-比爾定律，從此之后人們開始重視物質(zhì)對(duì)光的吸收，并在對(duì)物質(zhì)的定性和定量的分析中使用，很多的科學(xué)家在瑯伯-比爾定律的基礎(chǔ)上研制了很多用于分析的儀器，其中就包含“紫外可見分光光度計(jì)”。1945年美國(guó)Beackman公司推出了世界上*臺(tái)成熟的紫外可見分光光度計(jì)，并開始向市場(chǎng)推廣，隨后紫外可見分光光度計(jì)開始得到了飛速的發(fā)展。